分析型与制备型HPLC有何不同?

HPLC是一种多功能分析工具,可以对大范围的化合物进行分离和定量。它在基础研究,制药,食品,聚合物和其他类似应用中找到无限的应用。许多色谱柱,固定相,流动相和检测器的可用性使HPLC成为现代实验室中的高效实用设施。
 
分析型HPLC是其他HPLC技术如离子交换色谱,凝胶色谱和制备色谱柱的基础。如果没有对分析型HPLC进行初步研究,这些相关分支的发展是不可能的。本文的目的是提供分析型HPLC不同于制备型HPLC的清晰度。
 
首先要记住的是,所有提及的HPLC技术的基本原理是共同的,例如,样品引入,柱中样品组分的分离以及**后使用一系列检测技术进行检测。要使用制备分离开发合适的分离,您必须首先使用分析型HPLC进行初步研究,并适当升级**制备级。这两种技术之间的基本区别在于操作的规模以及其他差异将突出显示:
 
清晰的分析目标
在进行分析之前,您应该对分析目标有清晰的了解。您是否希望了解有关样品成分的性质,然后进行定量估算的信息,或者您希望将感兴趣的组分分离出来,然后收集所需数量以备将来参考和使用。在**种情况下,您必须使用分析型分离器,而在后者中,您必须求助于收集分离的组分。
 
操作规模
在分析级分离中,注入的样品量很小,通常为微升级,而在制备级分离时注入量较大,以便产生以毫克**克级的纯化合物。柱洗脱液而不是导入废物容器在通过非破坏性检测器后被导入分离收集器中的单独容器中。系统中的自动切换阀可根据检测器的峰值响应自动收集不同容器中的组分。可以进行多次注射来纯化和收集更多的数量。
 
柱尺寸
与分析柱相比,制备型HPLC柱较大。分析级色谱柱的直径为4.6mm,而制备色谱柱的内径通常在50-200mm的范围内。
 
与装有10μm以上大颗粒的制备级色谱柱相比,分析色谱柱填充3-5μm的固定相颗粒。这种颗粒尺寸允许柱子中有更高的流速。较长的长度和较宽的柱直径提供较低的背压。
 
注射模式
分析级分离通常涉及大量样品以及小的样品进样量,因此自动进样器是优选的进样模式。相反,在制备级分离中,样品数量很少,甚**可能有单个样品y,但注射体积较大,因此使用大体积注射环。
 
探测器的选择
由于分析要求,只有非破坏性检测器(如UV,荧光或折射率检测器)通常用于制备级应用。但是,由于样品量较大,与分析型分离相比,检测器具有更大的体积流通池。