凝胶过滤色谱原理

为了进行分离,将凝胶过滤介质填充到柱中以形成填充床。介质是呈球形颗粒形式的多孔基质,已选择其化学和物理稳定性以及惰性(缺乏反应性和吸附性)。填充床用缓冲剂平衡,该缓冲剂填充基质的孔和颗粒之间的空间。孔内的液体有时称为固定相,该液体与颗粒外的液体处于平衡状态,称为流动相。

  • 所用的固定相是多孔聚合物基质,其孔中完全充满了用作流动相的溶剂。
  • 样品中的分子被泵送通过含有此类微孔填充材料(凝胶)的专用柱。
  • 分离的基础是,一定大小以上的分子被完全排除在孔隙之外,而较小的分子则部分或全部进入孔隙内部。
  • 因此,流动相的流动将使较大的分子不受阻碍地通过色谱柱,而不会穿透凝胶基质,而较小的分子将根据其凝胶渗透而受阻。